李京京 , 方芳 , 张继冉 , 刘龙 , 堵国成 , 陈坚
2014, 33(12):1239-1245. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.002
摘要:氨基甲酸乙酯是发酵食品生产过程中的副产物, 具有致癌性和遗传毒性, 影响食品安全。酶法降解氨基甲酸乙酯是一种高效安全的去毒方法。从小鼠肠道筛选得到一株具有降解氨基甲酸乙酯活性的赖氨酸芽孢杆菌。通过对其细胞破碎上清液进行硫酸铵沉淀、离子交换层析、疏水层析和凝胶层析分离纯化, 得到了氨基甲酸乙酯水解酶纯酶。SDS-PAGE电泳图显示, 该酶亚基分子量约为50 kDa。该酶最适反应温度为35 ℃, 最适pH值为7.0, 在10~45 ℃时, 具有良好的热稳定性。以氨基甲酸乙酯为底物反应, 其Km和Kcat分别为37.2 mmol/L和1 176.4 s-1。金属离子显著抑制酶活力, 而EDTA对酶活力无影响, 表明此酶为非金属酶。此外, 该酶对低浓度的NaCl和乙醇有一定的耐受性, 具有在酱油和黄酒中去除氨基甲酸乙酯的应用潜力。
陈凤祥 , 关波 , 陈蕴 , 段作营 , 金坚 , 李华钟
2014, 33(12):1246-1250. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.003
摘要:探索共表达蛋白质折叠辅助因子Ero1、PDI和BiP对毕赤酵母GS115分泌表达融合蛋白质IFNβ-HSA的影响。将构建的蛋白质折叠辅助因子表达载体pGAP-Ero1、pGAP-PDI、pGAP-BiP和空载对照线性化后, 电击转化重组毕赤酵母GS115/IFNβ-HSA细胞, 用含有400 μg/mL zeocin的YPD平板筛选阳性转化子, 并采用PCR和Western blot法进一步鉴定。阳性转化子进行摇瓶发酵后, 采用SDS-PAGE及Western blot法分析共表达Ero1、PDI和BiP对IFNβ-HSA表达水平的影响。结果表明, Ero1、PDI和BiP成功地在胞内过量表达, 且不影响宿主细胞的正常生长; 共表达Ero1和PDI分别使IFNβ-HSA的表达量提高了80%和90%, 而共表达BiP则对IFNβ-HSA的表达水平无明显影响。
关国强 , 黄振兴 , 缪恒锋 , 任洪艳 , 赵明星 , 阮文权
2014, 33(12):1251-1255. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.004
摘要:介绍了某垃圾焚烧发电厂渗滤液厌氧出水的处理工程, 采用立体式厌氧/好氧反应池处理工艺。对反应池启动和调试过程中污染物的去除效果进行了分析。结果表明, 当处理负荷为COD 1.8 kg/(m3·d)和NH3-N 0.36 kg/(m3·d)左右时, 出水COD和NH3-N质量浓度分别低于1 900 mg/L和180 mg/L, 两者去除率分别高达80%和90%左右。经过120 d满负荷运行, 反应池展现出较好的抗冲击负荷能力, 出水指标均达到设计要求, 经过后续MBR处理可以达到3级排放标准。该工程能够有效节约占地面积。
郭会林 , 秦玉梅 , 蔡雯雯 , 查丽玲 , 袁飞飞 , 邓少平
2014, 33(12):1256-1263. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.005
摘要:用质量浓度为0.3 g/L的咖啡因溶液对6周大ICR小鼠进行21 d的长期慢性暴露, 暴露完成后采用实体显微镜观察、western-blotting、ELISA及血糖测定等技术, 分别检测了咖啡因对小鼠肠道小肠绒毛形态, 甜味感受和味觉信号转导蛋白质表达, 胰岛素和GLP-1、血糖耐受性的影响。与对照组相比, 咖啡因长期刺激增加了小鼠小肠绒毛高度, 降低了隐窝深度, 从而显著增加了绒毛绒腺比; 咖啡因长期暴露增加了小鼠肠道中甜味受体蛋白质T1R2和T1R3的表达, 降低了味觉信号传导分子α-gustducin表达, 然而对SNAP25的表达无显著影响; 此外, 咖啡因长期暴露显著增加了小鼠肠道对Insulin和GLP-1的释放敏感度, 因此也显著性增强了小鼠的血糖耐受性。结果表明, 咖啡因暴露可以改变小鼠小肠内的甜味感受通路和对机体血糖动态平衡产生影响。
龚强 , 丁利 , 肖家勇 , 吴新华 , 成婧 , 朱绍华 , 焦艳娜 , 付善良 , 王利兵
2014, 33(12):1264-1271. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.006
摘要:基于石墨烯固相萃取, 以实际样品为研究对象, 建立了食品接触材料中内分泌干扰物双酚A-二缩水甘油醚(BADGE)及其衍生物BADGE·H2O、BADGE·HCl、BADGE·2H2O、BADGE·2HCl、BADGE·H2O·HCl和双酚F-二缩水甘油醚(BFDGE)及其衍生物BFDGE·2HCl、BFDGE·2H2O 等9种双酚-二环氧甘油醚迁移量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。样品以叔丁基甲醚为提取溶剂, 超声提取, 提取液经石墨烯固相萃取柱富集、净化。质量分数0.1%乙酸的5 mmol/L醋酸铵溶液和甲醇为流动相, 经COSMOSIL C18分析柱分离后, 采用电喷雾串联四级杆质谱检测。9种双酚-二环氧甘油醚中2种在0.5~50 ng/mL范围内线性关系良好; 2种在5.0~100.0 ng/mL范围内线性关系良好; 其他5种在2.0~100.0 ng/mL范围内线性关系良好(r2>0.992 2)。对牛肉、橘片两种罐头食品进行3个水平的添加回收实验, 9种目标化合物的回收率分别为:60.0%~97.6%(牛肉)和65.7%~111.3%(橘片), 相对标准偏差小于20%。方法的检测低限为0.1~1.0 μg/kg。该方法操作简单, 灵敏度高, 成功应用于食品接触材料中双酚-二环氧甘油醚迁移量的快速检测。
2014, 33(12):1272-1277. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.007
摘要:黄原胶寡糖与琥珀酸酐反应, 得到3种衍生物XGOSSA-1、XGOSSA-2和XGOSSA-3, 对产物进行FT-IR表征, GPC法测定其相对分子质量分别为7 560、6 400和7 430, 3种衍生物的丙酮酸质量分数分别为4.6%、4.9%和4.9%, 还原糖质量分数分别为20.5%、19.4%和19.0%, 取代度分别为0.18、0.32和0.43。考察3种衍生物对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基和过氧化氢的清除活性以及还原能力。3种衍生物的抗氧化强弱顺序为:XGOSSA-1> XGOSSA-2>XGOSSA-3。即当相对分子质量, 还原糖和丙酮酸质量分数相近时, 随着取代度的升高, 抗氧化能力下降。造成这种现象的原因可能是随着取代度增大, 活性羟基数目减少, 导致抗氧化性能降低。
2014, 33(12):1278-1283. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.008
摘要:研究了pH值、金属离子及有机酸对脱味紫薯花色苷色素溶液颜色特征及其稳定性的影响。结果表明, pH 3.0附近时脱味紫薯花色苷色素溶液最稳定; 低浓度Fe3+有较强的增色作用, 高浓度且随着时间延长Fe3+会导致花色苷降解; Fe2+不仅无增色效果, 还会导致脱味紫薯花色苷降解褐变; 低浓度的Ca2+、Mn2+和Cu2+对脱味紫薯花色苷色素有一定的辅色作用。草酸、丙二酸和L-苹果酸对紫薯花色苷色素有较好的辅色作用, 提高了脱味紫薯花色苷色素的热稳定性, 其中草酸辅色最显著, 其次是丙二酸和L-苹果酸; 柠檬酸和阿魏酸的增色效果不显著, 抗坏血酸具有减色作用。
2014, 33(12):1284-1293. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.009
摘要:采用表达谱芯片技术, 研究了光滑球拟酵母细胞在不同渗透压条件下(860、1 765、2 603 mOs mol/kg和3 324 mOs mol/kg)的转录水平变化情况。结果表明, 在高渗透压条件下, 表达量大幅度提高的基因主要包括一些与细胞壁、细胞膜合成相关的基因, 以及细胞膜上的信息素蛋白质基因。中心代谢途径(即糖酵解途径、三羧酸循环和氧化磷酸化途径)整体表现为显著上调, 特别是参与ATP和NADH合成的相关基因。此外, 对可能作为相容性溶质的氨基酸, 如谷氨酸、脯氨酸、精氨酸的合成代谢途径的分析表明, 脯氨酸和谷氨酸合成途径中的酶转录水平均有一定程度的提高, 但是幅度不大; 而精氨酸分解途径中的尿素羧化酶转录水平发生显著下调, 其转录水平下降至1/100以下。
2014, 33(12):1294-1299. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.010
摘要:通过"Click"反应连接透明质酸与普朗尼克F127, 制备两亲性材料(HA-F127), 其结构通过1H NMR确认, 接枝率为13%。材料在水溶液中可自组装形成纳米粒子, 并能够包载抗肿瘤模型药物阿霉素。体外药物释放实验显示, 其具有温度敏感释药特性。透明质酸可识别肿瘤细胞外过度表达的CD44受体, 纳米粒子可靶向传递药物进入肿瘤细胞, 且表现出良好的治疗效果。
2014, 33(12):1300-1306. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.011
摘要:研究了黄曲霉毒素B1 (AFB1)和杂色曲霉素(ST)对人肝癌细胞HepG2的细胞毒性及其联合毒性。体外培养人肝癌细胞HepG2, 用不同浓度梯度的AFB1 (0.1、1、5、10 μmol/L)和ST(0.5、2.5、5、7 μmol/L)单独和联合作用于HepG2细胞24 h或48 h, 分别测量细胞活性、ATP含量、DNA受损程度、线粒体膜电位, 以及活性氧含量的变化, 通过统计分析得到两种毒素对HepG2细胞的联合毒性作用。结果显示, AFB1和ST对HepG2细胞的IC50分别为16.989 μmol/L和7.258 μmol/L, 细胞增殖力、ATP、DNA、线粒体膜电位、活性氧等指标的理论加和值与实际值无显著性差异(P>0.05)。同时, 这两种毒素及其混合物对HepG2细胞的作用终点均可分为3类:第一类为细胞增殖力的降低; 第二类包括ATP含量、DNA含量变化; 第三类为活性氧含量变化和线粒体膜通透性变化。表明AFB1和ST对HepG2细胞的联合毒性作用为加和作用。
2014, 33(12):1307-1311. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.012
摘要:利用高效液相色谱法对常山胡柚皮中柠檬苦素的含量进行测定, 比较了有机溶剂提取、水提取、超声波辅助提取条件下, 常山胡柚皮中柠檬苦素的提取得率。结果表明:用乙醇提取时, 提取温度50 ℃, 料液比1∶20(g/mL), 提取时间60 min, 柠檬苦素得率为2.97 mg/g; 用水提取时, 提取温度80 ℃, 料液比1∶25(g/mL), 提取时间90 min, 柠檬苦素得率为2.42 mg/g。超声辅助提取时, 以乙醇作为提取溶剂, 柠檬苦素得率为3.32 mg/g; 以水作为提取溶剂, 柠檬苦素得率为2.87 mg/g。
2014, 33(12):1312-1318. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.013
摘要:从关中地区的西安市区、临潼区、长安区, 以及杨凌周边地区, 分别采集地下热泉泉水水样, 采用培养法分别得到105株普鲁兰酶产生菌, 对其中21株进行16S rDNA基因片段序列分析。比对表明, 克雷伯菌属(Klebsiella)和芽孢杆菌属(Bacillus)在热泉生态系统中处于优势地位。根据统计结果, 所分离的菌株在种间和种内均有显著的酶活力差异。其中GP-1最适温度为50 ℃, 最适pH 4.0, 在50 ℃时有良好的稳定性, 保温30 min仍有92%剩余酶活。
2014, 33(12):1319-1325. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.014
摘要:研究了高水分固态发酵上部烟叶过程中烟叶微生物数量和化学成分的变化。结果表明:在高水分、常温好氧发酵中, 烟叶发酵到第二三天开始发霉, 发酵被迫终止。发酵过程中好氧细菌逐渐减少, 酵母和霉菌大量繁殖; 高水分、常温厌氧发酵过程中, 厌氧细菌小幅度减少, 酵母数量发酵前期迅速增加, 发酵到第4天后数量趋于稳定; 高水分、高温好氧和厌氧发酵过程中, 酵母和霉菌不再生长, 好氧细菌和厌氧细菌均大幅度减少; 在这4种发酵方式中, 烟叶淀粉和蛋白质的含量均随着发酵时间的延长而逐渐降低。
2014, 33(12):1326-1331. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.015
摘要:以大红八角整果为原料, 考察超临界CO2不同萃取条件对油树脂萃取及成分的影响。实验结果显示:超临界CO2萃取八角油树脂的最佳条件为原料粉碎后过1.50 mm孔径筛, 萃取压力25 MPa, 萃取温度55 ℃, 萃取时间2.5 h(5 L容积萃取釜, CO2体积流量50~60 L/h)。在此条件下, 油树脂相对于原料的得率为12.83%, 挥发油萃取效率为92.31%, 用GC-MS方法对八角油树脂的挥发性成分进行了分析, 其主要成分为反式茴香脑、D-柠檬烯、龙蒿脑等, 反式茴香脑的相对含量为83.74%。
2014, 33(12):1332-1237. DOI: 10.3969/j.issn.1673-1689.2014.12.016
摘要:建立了测定食品中苯并芘(B(α)P)含量的MAE-GC/MS法。样品经微波辅助萃取技术前处理, DB-5MS弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)分离, 以B(α)P m/z=252为选择离子, 串连四极杆选择离子检测模式检测, 再以9-苯基蒽为内标, 采用内标法定量。结果显示, B(α)P的检出限为0.01 μg/kg, 标准曲线线性范围为0~10 μg/mL, 相关系数为1.000, 方法回收率达97%~103%; 精密度良好:日内RSD<0.5%, 日间RSD<1%; 准确度良好:以阴性样品为基底物质, 在0.1 mL甲醇苯并芘成分分析国家标准物质(GBW08702)的加标水平上, 测定值在其标准值范围内。表明:该法前处理简单, 回收率高, 检出限、线性范围、准确度、精密度结果均满足要求, 可用于测定食品中的B(α)P含量。
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