摘要:活性天然产物具有多样的结构和活性，可作为小分子药物的主要来源。随着多重耐药菌和超级细菌的出现，迫切需要开发新型的活性天然产物。大片段克隆技术是近年来发现活性天然产物的重要手段，在获取活性天然产物生物合成基因簇方面展现出明显优势，结合高效的基因簇靶向筛选方法，显著加速了活性天然产物的发现。作者对各类活性天然产物进行了分类概述，随后对多种大片段克隆技术如人工染色体技术、Red/ET重组系统、TAR技术耦合CRISPR-Cas9系统进行了详细阐述，对不同类型技术的优缺点及应用范围进行了对比并展望了其未来前景，为活性天然产物的研发提供理论指导。

摘要:【目的】探究桂北大叶种红茶的风味特征与挥发性物质差异，解析品种香气形成的物质基础。【方法】通过感官审评、生化指标测定、顶空固相微萃取-气质联用（HS-SPME-GC-MS）技术以及香气活性值（OAV）分析等方法，结合化学计量学分析，对桂北大叶种红茶的风味特征与挥发性物质进行了深入分析。【结果】桂北大叶种香气属性高度相似，花果香最为显著。桂北大叶种红茶中共鉴定出88种挥发性物质，包括醇类、酯类、醛类、酮类、酸类等，其中酯类、醛类、酮类物质质量浓度较高，利用化学计量学分析，以变量重要性投影（VIP）>1且OAV>1.0为标准，共筛选出6种共有关键香气成分，其中芳樟醇、香叶醇和α-月桂烯是构成桂北大叶种红茶果香带花香的特征香气物质，壬醛是呈现馥郁花香的特征香气物质，水杨酸甲酯是呈现薄荷香的特征香气物质，β-紫罗兰酮是呈现浓郁清花香和奶香的特征香气物质。这些成分被认为是桂北大叶种红茶地域香的关键形成因子。【结论】桂北大叶种红茶的香气以花果香为显著特征，其关键香气物质为芳樟醇、香叶醇、α-月桂烯、壬醛、水杨酸甲酯及β-紫罗兰酮，这些物质协同构成了该茶种独特的地域香特征。

摘要:【目的】研究径向辐条蛋白RSP10如何完成纤毛组装，制备一种高特异性的RSP10多克隆抗体。【方法】首先构建原核表达载体pMal-C2X-rsp10，并在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达MBP标签的RSP10，待融合蛋白纯化后切除MBP标签，免疫新西兰雄性大白兔获得抗血清，以间接ELISA法测定其效价。【结果】通过Protein A和抗原抗体纯化后，获得了特异性强、灵敏度高的兔抗莱茵衣藻RSP10抗体，通过免疫荧光检测其定位于细胞基体部位，进一步分离纤毛组分发现RSP10大量存在于纤毛轴丝中，少量存在于纤毛基质中。【结论】该试验为后续研究RSP复合物如何完成组装及其影响纤毛运动的深层分子机理提供了有力的数据支撑。

摘要:【目的】改善咖啡酸苯乙酯（ caffeic acid phenethyl ester，CAPE）在水溶液中的分散度和利用度。【方法】以反溶剂分散法构建载CAPE大麦醇溶蛋白（CAPE-HD）纳米颗粒，对其理化性能进行表征，并考察其在Caco-2细胞内的抗氧化性能。【结果】CAPE-HD纳米颗粒中各组分之间通过氢键等非共价作用相互结合，并在形成纳米颗粒后，CAPE的存在状态发生了变化。CAPE-HD纳米颗粒呈近球形颗粒，平均粒径为193.93 nm，平均PDI为0.26，平均Zeta电位为14.50 mV，并在28 d内保持稳定。纳米颗粒具有良好的包封率和载药率，以及优越的生物相容性。抗氧化试验显示，CAPE-HD纳米颗粒在DPPH自由基清除能力和Caco-2细胞内均表现出良好的抗氧化活性。【结论】该纳米体系为提高CAPE等难溶性药物的生物利用度和临床使用率提供了一个新的平台和思路。

摘要:【目的】探究巴林右旗地区乳及传统发酵乳制品中的细菌多样性，为该地区乳及传统发酵乳制品中细菌资源的开发利用提供参考。【方法】以采集自巴林右旗的牛乳、胡乳达及查嘎的32份样本为研究对象，基于16S rRNA高通量测序技术分析其细菌多样性。【结果】巴林右旗地区乳及传统发酵乳制品的细菌群落多样性和丰富度存在显著差异。牛乳、胡乳达及查嘎中优势细菌门均为厚壁菌门和变形菌门，但不同样本之间差异极其显著（P<0.001）。牛乳中优势细菌属为乳球菌属（91.53%），查嘎中优势细菌属为乳杆菌属（72.68%）和醋酸杆菌属（25.54%），胡乳达中优势细菌属为乳球菌属（33.88%）、乳杆菌属（15.41%）、醋酸杆菌属（11.89%）、链球菌属（8.99%）、片球菌属（6.50%）、肠杆菌属（5.65%）、葡糖杆菌属（3.88%）、魏斯氏菌属（2.98%）、肠球菌属（2.30%）和志贺菌属（2.22%），相较于查嘎和牛乳，胡乳达中细菌属更为丰富。通过细菌基因功能预测发现，乳及传统发酵乳制品中细菌的基因代谢功能在Pathway level 1相对丰度最高的是Metabolism；在Pathway level 2相对丰度最高的是Global and overview maps。【结论】巴林右旗乳及传统发酵乳制品细菌群落差异显著，胡乳达群落丰富度最高，三者优势菌门一致但菌属不同，酸性环境是影响细菌多样性的重要因素；虽群落有别，但其细菌基因功能相似。

摘要:【目的】为评估菜市场中食源性大肠杆菌的耐药性及其传播风险，对浙江杭州3个菜市场市售猪肉、水产品、蔬菜以及污水进行大肠杆菌分离。【方法】通过16S rRNA测序鉴定菌株，纸片扩散法鉴定大肠杆菌的耐药表型，使用PCR技术检测分离株的耐药基因型和整合子，分析大肠杆菌耐药情况，并通过接合转移评估耐药传播特性，共现网络分析分离菌株耐药性传播风险。【结果】从180份样品中共分离得到68株大肠杆菌，K-B法药敏试验表明，大肠杆菌分离株大多数为多重耐药菌。其中阿莫西林、四环素和磺胺异噁唑的耐药率均在50%以上。PCR扩增耐药基因结果表明，四环素类耐药基因tetA的检出率最高，其次为sul1、blaTEM和tetB。此外，与菜市场A和菜市场C相比，菜市场B大肠杆菌耐药基因检出更严重。整合子检出率最高的基因是intI1（高达30.88%），整合子阳性菌中共8株菌携带基因盒。接合转移结果显示，3株菌株中四环素耐药基因tetA可通过质粒接合作用，转移到受体菌EC600中。共现网络分析显示，在大肠杆菌分离株中耐药基因和可移动元件之间有较高的共传播风险。【结论】作者调查了浙江杭州3个菜市场中大肠杆菌的耐药情况和传播风险，为保障菜市场食品安全提供理论依据。

摘要:【目的】构建一种快速、准确的表皮生长因子（EGF）检测方法。【方法】将4-甲酰基苯硼酸（4-FPBA）共价锚定到氨基碳纳米管（NH₂-MWCNTs）表面，合成纳米复合材料（NH₂- MWCNTs@4-FPBA），将NH₂-MWCNTs@4-FPBA修饰于玻碳电极上，当存在EGF时，4-FPBA通过苯甲醛基捕获EGF模板，再将电极浸入吡咯溶液中，电聚合形成吡咯分子印迹层，最后在酸性溶液中解离去除EGF模板后，即可形成与EGF模板互补的三维空腔。【结果】该传感器具有0.45~500.00 pg/mL的宽线性范围和0.45 pg/mL的低检测限，并具有良好的选择性、重复性和稳定性。【结论】利用该分子印迹电化学传感器检测出酸奶中EGF质量浓度为3.67 pg/mL，超高温瞬时灭菌牛乳中EGF质量浓度为29.03 pg/mL。

摘要:【目的】构建基于金属有机骨架修饰电极的电化学传感器，实现对饮料中葡萄糖溶液的高灵敏检测。【方法】通过原位合成法和固定化酶技术制备一种基于ZIF-8复合碳纳米管材料并固载葡萄糖氧化酶（GOx）的电化学传感器，使用X射线衍射仪（XRD）、扫描电镜（SEM）、光谱学仪器紫外（UV-Vis）和红外（IR）表征材料的微观结构和形貌，并结合电化学工作站对固定化酶电极进行电化学性能测试。【结果】制备的固定化酶电极对葡萄糖溶液展现出优异的检测性能，检出限为1.395 μmol/L。【结论】该传感器在食品检测领域具有良好的应用前景。

摘要:【目的】研究比较酸枣多糖（Ziziphus jujuba polysaccharide，ZJP）及其不同降解产物在化学组成和生物活性上的差异。【方法】采用α-L-鼠李糖苷酶、纤维素酶、蜗牛酶、三氟乙酸对ZJP进行降解，制备不同的酸枣多糖降解产物ZJP-R、ZJP-C、ZJP-S、ZJP-T，比较其化学组成及降解效果。在体外抗氧化、益生活性检测的基础上，以秀丽隐杆线虫为模型系统比较了不同降解处理对ZJP在体内抗氧化、抗衰老、抗应激及神经保护活性上的差异。【结果】不同降解处理方式下的ZJP中还原糖质量分数及平均聚合度差异显著。此外，Sephadex G-50凝胶层析洗脱图谱显示ZJP-S含有更多不同相对分子质量的低聚糖片段。体外活性结果显示，降解处理可显著提高ZJP的自由基清除能力、总还原力和促益生菌生长活性。体内活性结果显示，ZJP及其降解物给药处理可显著降低秀丽隐杆线虫体内氧化应激条件下的ROS积累，增强SOD酶活力，降低MDA质量摩尔浓度，延长秀丽隐杆线虫寿命，减少脂褐素的积累，增强热应激、急性氧化应激抵抗能力。ZJP降解后生物活性提高，尤其是ZJP-S在多个指标评价中活性效果最显著。此外，ZJP-C及ZJP-S在亨廷顿病和阿尔茨海默病模型秀丽隐杆线虫中均表现出显著的神经保护活性。【结论】降解处理可增强ZJP的生物活性，其中ZJP-S更好的生物活性可能与蜗牛酶降解产生更丰富的低聚糖及还原糖片段相关，该研究为酸枣资源的开发利用提供了参考。

摘要:【目的】分析刺五加（APS）与树舌灵芝（GA）以质量比5∶1（m_APS：m_GA=5∶1）配伍前后醇提物的成分变化，探究其免疫调节作用及指标成分。【方法】采用环磷酰胺（CTX）诱导小鼠建立免疫低下模型、2，4-二硝基氯苯（DNCB）诱导小鼠建立迟发型超敏反应模型（DTH），探究其配伍醇提物对免疫系统的影响；采用超高效液相色谱-质谱联用技术（UHPLC-MS）分析配伍前后有效成分变化；采用差热分析判断配伍后是否有新物质生成；采用单一溶剂萃取法对化学成分进行定性分析。【结果】刺五加-树舌灵芝（质量比5∶1）醇提物具有较强的免疫调节作用；超高效液相色谱-质谱联用技术检测发现配伍后醇提物中的有效成分质量分数与2种药物的质量成正比；差热分析结果显示配伍后产生了不同于刺五加和树舌灵芝的新化合物，主要为鞣质、含氧杂环蒽醌类、多糖类、挥发油或油脂类化合物。【结论】刺五加-树舌灵芝（质量比5∶1）醇提物具有较强的免疫调节作用，这可能与配伍产生的新化合物共同作用有关，可作为刺五加-树舌灵芝的质量评价指标成分。

摘要:【目的】探究天然抗氧化剂（+）-儿茶素及其同分异构体（-）-表儿茶素基于Nrf2-ARE通路对HEK293T细胞抗氧化的影响及差异。【方法】以（+）-儿茶素、（-）-表儿茶素为试验对象，利用MTT法探究对HEK293T细胞活力的影响，应用报告基因探究对ARE基因转录水平的调控作用，利用RT-PCR和Western blot方法探究对Nrf2-ARE信号通路下游基因（GCLM、NQO1和HO-1）和蛋白（GCLM、NQO1和HO-1）表达的影响。【结果】报告基因显示，（+）-儿茶素及（-）-表儿茶素分别在20、10 μmol/L显著诱导了ARE介导的转录激活。RT-PCR及Western blot结果表明，当浓度为40 μmol/L时，（+）-儿茶素可以显著上调GCLM、NQO1和HO-1基因表达，（-）-表儿茶素可以显著上调NQO1和HO-1基因表达；当浓度为10 μmol/L时，（+）-儿茶素可以上调GCLM、NQO1和HO-1蛋白表达，（-）-表儿茶素可以上调GCLM、HO-1蛋白表达。【结论】（+）-儿茶素、（-）-表儿茶素对细胞的最低影响浓度不同。二者均有激活Nrf2-ARE信号通路的能力，（-）-表儿茶素激活通路所需浓度低于（+）-儿茶素，对于Nrf2-ARE信号通路下游基因及蛋白的表达也有差异，相同浓度时（+）-儿茶素抗氧化基因和蛋白表达效果更好。

摘要:【目的】探究α-淀粉酶添加量对婴幼儿米粉理化特性和品质特性的影响。【方法】制备不同α-淀粉酶添加量的婴幼儿米粉，测定婴幼儿米粉的基本成分、淀粉相对分子质量、糊化特性、水合特性、质构特性、体外消化特性及微观结构，并分析婴幼儿米粉的理化特性与品质特性之间的相关性。【结果】婴幼儿米粉中淀粉的重均分子量和数均分子量随着α-淀粉酶添加量的增加而降低。添加α-淀粉酶的婴幼儿米粉糊化特性曲线较平缓，未添加α-淀粉酶的婴幼儿米粉的糊化特性指标均显著高于添加酶的婴幼儿米粉（P<0.05）。吸水性指数和膨润力随着α-淀粉酶添加量的增加而降低。α-淀粉酶添加量为1.8 U/L的婴幼儿米粉感官评分最高。质构特性指标随α-淀粉酶添加量的增加而降低。添加α-淀粉酶的婴幼儿米粉的淀粉颗粒小且多，米粉表面的孔洞更加密集。添加α-淀粉酶的婴幼儿米粉快消化淀粉质量分数增加，抗性淀粉质量分数降低。婴幼儿米粉的感官评分与谷值粘度呈显著负相关（P<0.01），抗性淀粉的质量分数、硬度、浓稠度、内聚性和黏附性与其淀粉相对分子质量、吸水性指数以及糊化特性指标均呈显著正相关（P<0.01），与水溶性指数呈显著负相关（P<0.01）。【结论】添加α-淀粉酶可以显著改善婴幼儿米粉的特性，其中α-淀粉酶添加量为1.8 U/L的婴幼儿米粉的综合品质最佳。

摘要:【目的】研究香辛料对涪陵榨菜微生物菌落结构及挥发性风味物质的影响，并探究主要优势微生物菌属与挥发性风味成分种类间的相关性。【方法】采用高通量测序和顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用（HS-SPME-GC-MS）技术研究香辛料对腌制涪陵榨菜微生物菌落结构和挥发性风味成分的影响，基于Pearson相关系数揭示主要优势微生物菌属与挥发性成分种类间的相关性，并检测了榨菜总酸、亚硝酸盐和还原糖等理化特性。【结果】对照组主要优势菌属为乳杆菌属（Lactobacillus，35.61%）、盐单胞菌属（Halomonas，15.13%）、明串珠菌属（Leuconostoc，10.40%）、德巴利氏酵母属（Debaryomyces，77.51%）等；添加香辛料组主要优势菌属为乳杆菌属（Lactobacillus，80.49%）、德巴利氏酵母属（Debaryomyces，43.17%）、未指明酵母菌（unclassified_k_Fungi，28.33%）等。对照组检测出挥发性风味成分60种（总质量分数为1 286.94 μg/kg），主要为酯类、有机硫化物类和酸类；添加香辛料组检测出挥发性风味成分84种（总质量分数为14 304.21 μg/kg），主要为醇类、醚类和酸类。添加香辛料组的总酸质量分数（10.95 g/kg）高于对照组（7.14 g/kg），亚硝酸盐质量分数（5.57 mg/kg）也高于对照组（3.13 mg/kg）。乳杆菌属与醇类、醚类、烯烃类、酸类、酮类和酚类呈高度显著正相关（P<0.001），与有机硫化物呈高度显著负相关（P<0.001）；德巴利氏酵母属、盐单胞菌属、明串珠菌属与大部分挥发性风味成分种类呈显著负相关（P<0.05）。【结论】添加香辛料能增加榨菜酸度，提高乳酸菌属相对丰度以及真菌优势菌群数；调控榨菜发酵过程的乳杆菌属、节担菌属和链格孢属的丰度，有助于改善榨菜的风味。

摘要:【目的】探究做形与烘焙工艺对圆炒青绿茶抗氧化活性的影响，为提升绿茶品质与优化加工技术提供理论支撑与实践参考。【方法】以圆炒青绿茶为对象，研究不同加工阶段及做形、烘焙等关键工序对其抗氧化活性的影响；采用斑马鱼模型（体内）以及DPPH自由基和ABTS⁺自由基清除率、铁离子还原能力（体外）等多指标综合评价其抗氧化性能。【结果】做形与烘焙条件对绿茶抗氧化活性具有显著影响。在不同烘焙温度下，做形温度的作用表现各异，例如在烘焙温度75 ℃、烘焙时间20 min、烘焙2次的条件下，90 ℃做形处理的DPPH自由基清除率显著高于120 ℃和150 ℃做形处理；而在做形温度90 ℃、做形时间50 min的条件下，105 ℃烘焙处理的铁离子还原能力显著优于75 ℃烘焙处理。通过工艺优化，确定最佳组合为做形温度90 ℃、做形时间50 min、烘焙温度90 ℃、烘焙时间20 min、烘焙2次，该工艺下绿茶DPPH自由基清除率较工厂常规工艺提升了43.54%。【结论】优化做形与烘焙工艺可显著增强圆炒青绿茶的抗氧化活性，为绿茶精细化加工与品质提升提供了科学支撑。

摘要:【目的】研究植物甾醇油脂体乳液（phytosterol-oil bodies emulsion，POE）的降脂作用。【方法】以秀丽隐杆线虫为模型，测定POE处理后线虫的脂代谢和生理相关指标，并分析线虫氧化应激和脂肪代谢相关基因水平变化。【结果】与对照组相比，不同质量浓度POE给药组可显著降低线虫肠道脂肪质量分数（P<0.01），显著降低甘油三酯的相对含量（P<0.05），对线虫生长发育无毒害作用；同时，还能显著降低活性氧水平，提高抗氧化酶水平；影响与脂肪代谢相关基因表达水平，qPCR检测结果显示，sbp-1基因mRNA水平上调，fat-2、nhr-80、fat-5 mRNA水平下调（P<0.05）。【结论】POE可能通过减缓脂肪沉积、调节脂肪过氧化途径和减轻线虫体内氧化应激水平来改善脂质代谢。

摘要:【目的】提高解硫胺素芽孢杆菌JXN-1的己酸产量。【方法】采用Plackett-Burman试验从8种培养基成分中筛选出影响己酸产量的显著因素；通过最陡爬坡试验确定显著因素的最佳水平范围；利用Box-Behnken试验建立二次多项式回归模型，并对显著因素的交互作用进行分析，预测最优培养基组合。【结果】Plackett-Burman试验筛选出乙酸钠质量浓度、四氢叶酸钙质量浓度和乙醇体积分数为显著影响因素。Box-Behnken试验建立的回归模型极显著（P<0.01），模型预测的最佳培养基组合为：蔗糖质量浓度7.50 g/L、酵母膏质量浓度1.00 g/L、七水硫酸镁质量浓度0.20 g/L、乙酸钠质量浓度4.08 g/L、硫酸铵质量浓度0.45 g/L、四氢叶酸钙质量浓度2.88 mg/L、磷酸氢二钾质量浓度0.60 g/L、乙醇体积分数2.53%，该条件下发酵液中实测己酸质量浓度与模型预测值高度吻合，较优化前提高了212.47%。【结论】作者成功优化了解硫胺素芽孢杆菌JXN-1产己酸的发酵培养基。优化后的培养基能显著提升己酸产量，为该菌株在白酒酿造中的实际应用提供了理论依据和技术参考。

摘要:【目的】优化金萱红茶茶膏制备工艺，提升茶多酚含量，并比较不同加工方式对茶膏挥发性成分的影响。【方法】以金萱红茶干茶作为原料，利用响应面试验考察茶水比、酶添加量、超声功率和超声时间对红茶茶膏茶多酚质量分数的影响；并采用顶空固相微萃取（headspace solid-phase microextraction，HS-SPME） 结合气相色谱-质谱联用（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）技术对真空冷冻浓缩（NP）、酶+真空冷冻浓缩（WB）和旋转蒸发浓缩+真空冷冻浓缩（B）3种不同加工方式下红茶茶膏中的挥发性成分进行检测分析。【结果】红茶茶膏的最佳工艺条件为茶水比1 g∶20 mL、酶添加量30 mg/g、超声功率514 W、超声时间21 min，此时金萱红茶茶膏中茶多酚质量分数为269.34 mg/g。从NP、WB和B中分别鉴定出103、107、84种挥发性成分，并在NP、WB和B中均检测到芳樟醇、苯甲醇、3-甲基丁醛、苯甲醛、苯乙醛、月桂烯和吡咯等呈花香、果香的挥发性成分；酶解后，WB比NP挥发性成分质量分数增加4 014.39 μg/kg，在B中未检测到3，7-二甲基-1，5，7-辛三烯-3-醇、柠檬烯、吡嗪类等呈花香、果香挥发性成分。【结论】酶解结合真空冷冻干燥能够提高红茶茶膏的挥发性成分质量分数。